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母种制作及使用过程中应注意的事项一、培养基的使用 制成的母种培养基,在使用前应做无菌检查,一般将其置24℃左右的恒温箱内培养28小时,证明无菌后方可使用。制作好的培养基,应及时用完,不宜久存,以免降低其英文价值或成分发生变化。二、出菇鉴定 投入生产的母种,不论是自己分离的菌种还是由外地引入的菌种均应做出菇鉴定,全面考核其生产性状、遗传性状和经济性状后,方可用于生产。母种选择不慎,将会对生产造成不可估量的损失。三、母种保藏 已经选定的优良母种,在保藏过程中要避免过多转管。转管时所造成的机械损伤,以及培养条件变化所造成的 不良影响,均会削弱菌丝的生活力,甚至导致遗传性状的变化,使出菇率降低,甚至造成菌丝的“不育性”而丧失形成子实体的能力。因此,引进或育成的菌种在第一次转管时,可较多熟料的扩转,并以不同方法保藏,用是从中取出一管大量繁殖作为生产母种用。一般认为保藏的母种经过3-4次代转,就必须用分离方法进行复壮。四建立菌种档案 母种制备过程中,一定要严格遵守无菌操作规程。并标好菌种标签,注明菌种名称(或编号)、接种日期和转管次数,尤其在同一时间接种不同的菌种时,要严防混杂。 母种保藏应指定专人负责,并建立“菌种档案”,详细记载菌种名称,菌株代号、菌种来源、转管时间和次数,以及在生产上使用的情况。五防止误用菌种 从冰箱取出保藏的母种,要认真检查贴在试管上的标签或标记,切勿使用没有标记或判断不准的菌种,以防误用菌种而造成更大的损失。六母种选择 保藏的母种菌龄不一致,要选择菌龄较小的母种接种;切勿使用培养基已经干缩或开始干缩的母种,否则会影响菌种成活或导致生产性状的退化。七菌种扩大 保藏时间较长的菌种,菌龄较老的菌种或对其存活有怀疑时,可以先接若干管,在新斜面上长满后,用经过活化的斜面在进行扩大培养。八防治污染 保藏母种,在接种前,应认真地检查是否有污染现象。斜面上有明显绿、黄、黑色菌落,说明已遭受霉菌污染;管口内的棉塞,由于吸潮生霉,只要有轻微震动,分生孢子很容易溅落到已经长好的斜面上,在低温保藏条件写受到抑制,很难发现;将斜面放在向阳处,从培养基背面观察,在气生菌丝下面有黄褐色圆形或不定型斑块,是混有细菌的表现。已经污染的母种不能用于扩大培养。九、活化培养 在冰箱中长期保藏的菌种,自冰箱取出后,应放在恒温箱中活化培养,并逐步提高培养温度,活化培养时间一般为2-3天。如在冰箱保存时间超过3个月,最好转管培养一次在使用,以提高接种成功率和萌发速度。 保藏的菌种,不论任何情况下都不可全部用完,以免菌种失传,对生产造成损失。十菌种保存 认真安排好菌种生产计划,菌丝在斜面上长满后立即用于原种生产,能加快菌种定植速度。如不能及时使用,应在斜面长满后,及时用玻璃纸或硫酸纸包好,置于低温避光处保存